Prosztatarák imss
A mitokondriális apoptózist indukáló faktor agyspecifikus izoformája: AIF2 témákIntracelluláris jelátviteli peptidek és fehérjékMitokondriumokNeurodegeneráció Absztrakt Az apoptózist indukáló faktor ABA fontos támogató és potenciálisan halálos szerepet játszik a neuronokban. Normál fiziológiai körülmények között az ABA prosztatarák imss létfontosságú redox-aktív mitokondriális prosztatarák imss, míg a patológiás helyzetekben a mitokondriumoktól a sérült neuronok magjává alakul át, és apoptotikus kromatin kondenzációt és sejtpusztulást közvetít.
Ebben a tanulmányban kimutattuk, hogy létezik egy AIF, az AIF2 agyspecifikus izoformája, amelynek expressziója fokozódik, amikor a neuronális prekurzor sejtek differenciálódnak. Az AIF2 az alternatív 2b exon hasznosításából származik, ugyanakkor ugyanazokat a 15 exont használja, mint a mindenütt jelenlévő AIF1 izoformát.
Kek Mezanna11
Az AIF1 és az AIF2 hasonló módon importálódik a mitokondriumokba, amelyekbe az intermembrán tér felé néző belső membrán horgonyzik. A nem ionos detergensek vagy az alap pH-értékének kitettsége miatt az AIF2-t nehezebben deszorbeálják a mitokondriumoktól, mint az AIF1-től. Fő Az apoptózist indukáló tényezőt AIF prosztatarák imss mitokondriális intermembránfehérjékként írták le, amely a mitokondriumokból a sejthalál indukció körülményei között szabadul fel, és amely izolált magokat indukálhat nukleáris zsugorodás és kromatinolízis során, amelyek két jellemzője az apoptózishoz.
Az egerekben kimutatták, hogy a Hq mutáció csökkenti az akut neuronális sejtpusztulást az ischaemia, a hypoglykaemia és a neurotrauma után a fiatal állatokban, mielőtt a Hq-ral összefüggő neurodegenerációt megnyitnák.
Az AIF1 és az AIF2 aminosavszekvenciájának rövid szakaszában csak az N-terminális régióban különbözik egymástól, amelyet az érett fehérjéből eltávolítanak, mivel az átülteti a magba. A fent említett izoformákon kívül egy alternatív transzkripciós starthely, amely az Prosztatarák imss 9 intronján található, a fehérje rövid változatából AIFsh származik, amelyből hiányzik az N-terminális MLS és a redox-aktív domén, de megtartja a nukleáris lokalizációs szekvenciát NLS.
Az AIFsh transzfekcióval kiváltott túlzott expressziója apoptózist okozó nukleáris fehérjét eredményez. Az AIFsh2 egy csonka fehérje, amely nem rendelkezik a C-terminális pro-apoptotikus doménnel, de megőrzi mitokondriális lokalizációját és redox funkcióját.
Mindkét rövid ABA izoformája a normál szövetekben kevésbé bőségesnek tűnik, mivel az immunoblot nem észlelte őket, kivéve az Prosztatarák imss, amelyről állítólag a májkivonatokban van jelen.
Az AIF neurodegenerációban bekövetkező patofiziológiai hatásának köszönhetően, 9, 11, 12 teljes körű funkcionális és biokémiai jellemzést hajtottunk végre az AIF2 izoformán, és fontosabb, hogy az AIF1-hez képest az AIF2 erősebb rögzítési kapacitással rendelkezik a belső mitokondriális membránhoz. Ezek az eredmények arra engednek következtetni, hogy a neuronspecifikus AIF2-izoformot úgy tervezték meg, hogy mitokondriális funkciókat tartson fenn, mégis csökkenti a pro-apoptotikus aktivitását.
A 2a és 2b alternatív exonok az emlősök között filogenetikusan konzerválódnak.
Hasonlóképpen, a két exon gén-duplikációval jött létre az emlősök spekulációja előtt az adatokat nem mutatjuk prosztatarák imss. Valójában sikerült nyomon követni a duplikációs eseményt csirke genomra, amelyben a 2a. Emlős exonnal homológ régió található a 2b exon 5'-jén a 4.
Betegszoba TV - A prosztatarák tünetei
Így a 2a és 2b exonok kimutathatók a primátumok, rágcsálók és más emlősök például az Equus caballus és a Canis familiaris publikált cDNS-szekvenciáiban NCBI-Homologen adatbázismíg csak egy exon 2, amely az prosztatarák imss 2b exonjához hasonlított, csirke cDNS-könyvtárakban 1. A 2a és 2b exonok több állatfajból származó aminosav-elrendezése két pozitív töltésű és egy negatív töltésű közös maradékot, valamint konzervált motívumokat tárt fel a hidrofób szakaszokkal 1c.
A másodlagos szerkezeti előrejelzések azonban a változó maradékok prosztatarák imss és azok differenciál tulajdonságait jelzik a két exon által kódolt szegmens potenciális másodlagos szerkezetére 1d.
Képfeldolgozás Absztrakt A sejtmotilitást komplex molekuláris gépek szabályozzák, amelyek a fizikai-kémiai jeleket teljes sejtmozgássá alakítják át. Az alapul szolgáló biofizikai mechanizmusok megértése lehetővé teszi a sejten belüli fizikai mennyiségek egyszerű, reprodukálható és előnyösen nem invazív módon történő mérését.
A fehérje többi része azonos mindkét izoforma esetében. A két izoform között különbözõ maradékok piros színûek. Az exon 2-kódolt polipeptidek nyilvános prosztatarák imss származó mutiple-illesztése a 2a és 2b exon korlátozott egyidejű alkalmazását mutatja az emlősöknek.
A mitokondriális apoptózist indukáló faktor agyspecifikus izoformája: AIF2
Ezt a fát szomszédos összekapcsolási módszerrel nyerik, miután a clustalW többszöri beállítást végez. A 2a-exon exon 2b-kódolt polipeptidszegmensei, az 1b. Ábrán bemutatott azonos organizmusokból származó többszörös igazítását clustalW többszörös igazítási program alkalmazásával érjük el.
A csillag teljesen konzervált maradványokat jelez. A pontok hasonló tulajdonságokkal rendelkező maradványokat jeleznek. A maradványmegőrzés hisztogramja az ábra alján látható. Ez az általános expressziós profil hasonló volt minden vizsgált egérszövetnél, amelyben az AIF2 mRNS ismét az agyra korlátozódott 2c.
Mind az emberek, mind az egerek esetében az ABA-k alacsony szintje volt kimutatható az agyban a többi szervhez képest. Ez valószínűleg tükrözi az agyban lévő mitokondriumok összehasonlító hiányát, mivel az AIF fehérje és a leggyakoribb külső mitokondriális membránfehérje, a VDAC aránya hasonló az prosztatarák imss különböző szerveihez, beleértve az agyat.
Ennek megfelelően az egér embrionális telencephalikus sejtjeit, amelyeket hőre érzékeny SV40 nagy T-antigénnel tsA58 LT-Ag immortalizáltak 3a.
Ábra vagy v-Myc retrovírus vektorral immortalizált humán embrionális mesencephalikus sejteket 3c. Ábra stimulálhatunk magasabb AIF2 expressziójára. Így az AIF2 kifejezetten és differenciálisan expresszálódik az agysejtekben, attól függően, hogy milyen érettségi állapotuk van. Az emberi mintákra a, b kapott adatok három független kvantifikációnak felelnek meg átlag ± SD és az egér szervek esetében c, d legalább három független kísérlet átlag ± SD értékét képviselik.
Az adatok három független kísérletet jelentenek átlag ± SD. Az AIF2- t azonban neuroblasztomák egy töredéke 4a. Ábra fejezte ki, összhangban a normál, nem transzformált szöveteken kapott adatokkal lásd a 2. Összefoglalva, az AIF2 neuronszövetekre és neuroblasztómákra jellemző.
Az átlag ± SD értéket két független kísérletből nyerjük Teljes méretű kép Az AB2 sejtes és prosztatarák imss lokalizációja A felnőtt egér agy és az izoformspecifikus próbák összehasonlító in situ hibridizációi az AIF1 és az AIF2 mRNS-ek hasonló makroszkópos eloszlását mutatták, a csúcsintenzitásokkal a szaglási izzóban, a rostrális vándorlási patakban, a szagló kéregben és az agyalapi mirigyben 5a — f.
Annak elemzésére, hogy mindkét AIF izoformát ugyanabban a sejtben fejezzük ki, egyidejűleg fluoreszcens in situ hibridizációt FISH végeztünk differenciálisan jelölt exon 2a és 2b-specifikus próbákkal piros és zöld. Ha a transzfektált sejteket paraformaldehiddel és Triton Xmal fixáltuk és permeabilizáltuk, és prosztatarák imss antitesttel festettük 6a. Ábramindkét fehérjét hasonló módon újraelosztottuk mitokondriumokba amelyeket mátrix-célzott fluoreszcens fehérjével, dsRed-mitóval jelöltünka mitokondriális hálózat általános alakjára nem észrevehető hatással van.
Ilyen körülmények között a Flag-specifikus antitest hozzáférést kapott prosztatarák imss AIF1-hez és az AIF2-hez hasonlóan, amint a külső mitokondriális membrán permeabilizálódott 6b. Ábraösszhangban azzal a meggyőződéssel, hogy mindkét fehérje megjelöli a jelzett C-végüket az intermembránnak tér. Ábra és más nem ábrázolt komplex I alegységek expressziójának jelentős csökkenését eredményezték. Ezek az eredmények alátámasztják azt a hipotézist, miszerint mindkét AIF izoforma ugyanabban a beadóondrégióban van lokalizálva, amelyben mindkettő prosztatarák imss az I komplex biogenezist vagy stabilitását a légzési láncból.
Meg kell jegyezni, hogy az ABA légzőszervi és redox funkciói szorosan kapcsolódnak, mivel a redox-hiányos ABA mutánsok nem képesek helyreállítani a légzési lánc komplex I bőségét és működését az ABA prosztatarák imss cellájából. Nemrégiben Churbanova és mtsai. Az AIF1 vagy az AIF2 túlexpressziója nem volt káros hatással a proliferációs ráta nem láthatóés nem befolyásolta a sejtek légzési kapacitását és kontrollját Kiegészítő ábra 4b.
Mindazonáltal mindkét AIF izoforma differenciáltan befolyásolta a mitokondriumok ultrastruktúráját, amint azt a transzmissziós elektronmikroszkóppal TEM detektálhatjuk. Bár ezt az eredményt olyan körülmények között kaptuk, amikor a két AIF izoformát túlzott mértékben expresszálták, finom különbségeket mutatott a feltételezett transzmembrán doméneknek a mitokondriális membránszerkezetre történő behelyezésének hatásában.
A CT metasztázisok kontrasztot mutatnak A számítógépes tomográfra felvett képen a szokásos metasztázisok a csökkentett sűrűségű zónáknak tűnnek. De néha a rákos sejtek azonosítása a képeken nehéz lehet: Egyes szervek szövetei, például a máj; szorosan elhelyezett vérzések; a metasztázisok meszesedése. Ilyen esetekben a kontraszt CT-be történő áttétje közvetlenül a beteg előtt közvetlenül az eljárás előtt jelentkezik. Ugyanakkor a prosztatarák imss tomográfia képeinél a metasztázist fokozott kontraszt jellemzi, mivel bérleti sűrűsége csökken.
Mindkét frakcióban lévő fehérjéket SDS-PAGE-val választottuk el, majd Western-blot-módszerrel analizáltuk a jelzett fehérjék ellenanyagai alkalmazásával.
A nagy sebességű ultracentrifugálás után kapott citoszol és membrán frakciókat SDS-PAGE és western blot elemzéseknek vetettük alá a jelzett antitestek alkalmazásával.
Ezután az egész sejt lizátumokat bevitelvalamint a ko-immunprecipitált fehérjéket SDS-PAGE-val oldottuk, és a jelzett antitestek prosztatarák imss Western blot analízisnek vetettük alá. A nyilak jelzik a jelzett és az endogén Prosztatarák imss fehérjék elektroforetikus helyzetét Teljes méretű kép Arra a következtetésre jutunk, hogy az ABA2-t nehezebben lehet felszabadítani a mitokondriumokból, mint az ABA1.
Ez a különbség nem magyarázható a hasítási hely konszenzus szekvenciájával a calpains és a katepszinnel, amely mindkét fehérje esetében azonos. Ennek a lehetőségnek az alátámasztására Churbanova et al.
Ebben az összefüggésben az ABA molekulák dimerizációját is javasoljuk. Így a két AIF izoforma homo- vagy heterodimert vagy magasabb rendű oligomereket képezhet. Ennek megfelelően feltételezzük, hogy az AIF2 gátló hatása az AIF1 kibocsátásra azzal magyarázható, hogy a két izoforma közötti fizikai kölcsönhatás megnehezíti az AIF1 mitokondriális felszabadulásával kapcsolatos hasítását, ha az AIF2 jelen van.
Záró megjegyzések Ebben a tanulmányban összehasonlítóan elemeztünk két olyan AIF-izoformát, amelyek kizárólag az egyik exon 2.
Ennek prosztatarák imss az AIF1 és az AIF2 N-terminálisai különböznek a primer szekvenciájukban és a hidrofóbitásukban, és magyarázzák az AIF1 viszonylag parazitákat kezelni és továbbadni társulását amely kevésbé hidrofób N-terminális, mint az AIF2 a belső mitokondriális membránnal.
Következésképpen az AIF2 nehezebben szétválasztható a mitokondriális membránoktól, függetlenül a deszorbálószer jellegétől nem ionos detergensek, bázikus pH vagy MNNG ingerekami arra utal, hogy az AIF2 kevésbé hatékonyan járul hozzá az apoptózishoz, mint az AIF1.
Az AIF2- t kizárólag a fejlődő és prosztatarák imss felnőtt központi idegrendszerben, valamint a retinában fejezték prosztatarák imss amely neuronokat tartalmaz, és fejlődési és anatómiai szempontból egy központi idegrendszer-származék. Hasonlóképpen, az AIF2 is jelen volt a neuroblasztómákban, de nem más típusú nem neuronális szövetekből származó tumorban. Az AIF1 és az AIF2 megosztja létfontosságú funkcióit a mitokondriális légzés tekintetében, míg az AIF2 szorosabban kötődik a mitokondriális membránokhoz, és így kevésbé valószínű, hogy közvetíti a sejthalált ami megköveteli az ABA mitokondriális felszabadulását és nukleáris transzlokációját.
Ha ez a hipotézis helyes volt, a 2b exon amely az AB2-t eredményezi felhasználása stratégia lehet az ABA-tól függő neurotoxicitás elkerülésére. Ennek a hipotézisnek a prosztatarák imss exon 2b-specifikus kiütéseket kell létrehozni és értékelni, hogy önmagukban vagy neuronális sérülések esetén feltételezhető neurotoxicitásuk van-e. Riasztásként meg kell említeni, hogy az ABA expressziós szintje mély hatást gyakorol a neuronális differenciálódásra.
«Боже всевышний.
Ezért továbbra is hivatalosan lehetséges, hogy az ABA2 de nem az AIF1 szorosan kapcsolódik a központi idegrendszeri fejlődéshez, és hogy az exon 2b-specifikus kiütés jelentős agyi hibákat okoz. Ezeket az érdekes hipotéziseket a jövőben tanulmányozzák.
Kiegészítő információk.
